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Lj 2 x HotStart Taq Master Mix

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產(chǎn)品描述

本制品是將PCR反應所需的HotStart Taq酶、dNTP s 、MgCL2 以及反應提沖液預先配制成2倍濃度的混合物。使用時(shí)只需加入模板和引物并稀釋到1倍濃度即可進(jìn)行PCR反應，大大地簡(jiǎn)化了操作過(guò)程，減少了PCR操作過(guò)程中的污染。本制品所使用的HotStart Taq是經(jīng)特殊工藝處理后的Taq酶，在加熱至高溫前，其聚合陪活性被抑制從而抑制低源條件下由引物的非特異性退火或引物二聚體引起的非特異性。

本制品適用于高特異性PCR反應、Multiplex PCR、高GC含量（>60%），有二級結構等有較強背景的基因組擴增和大規?；蚪M擴增檢測。

本產(chǎn)品經(jīng)多次柱純化，SDS-PAGE檢測僅見(jiàn)清晰單一條帶，PCR檢測無(wú)大腸桿菌DNA殘留，未發(fā)現核酸內、外切酶活性。

活性定義

熱激活后，在74℃條件下，30分鐘內催化10nmol dNTPs的摻入反應為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個(gè)單位(1U)。

產(chǎn)品特點(diǎn)

簡(jiǎn)便：無(wú)需改變常規熱啟動(dòng)酶PCR程序，可在所有正常PCR程序中實(shí)現熱啟動(dòng)PCR的效果。

：有效減少了雜帶及拖帶產(chǎn)生，從而實(shí)現高特異性的PCR。

靈敏：可從0.05ng人基因組DNA模板中擴增出特定基因片段。

使用建議

使用本試劑擴增得到的PCR產(chǎn)物3´端有一突出"A"堿基，可直接克隆于T-vector中。

運輸和儲存

-20℃運輸和保存，避免反復凍融，在保存條件下可保存1年。

使用方法

注意事項

1.   需溶解*后使用， 防止離子濃度不均勻。

2.   應根據實(shí)驗目的選擇合適的循環(huán)數，循環(huán)數過(guò)少，會(huì )導致擴增量不足。循環(huán)數過(guò)多，擴增量增加，但突變率會(huì )增加，并造成非特異性擴增。

3.   根據引物Tm 值設置合適的退火溫度，退火溫度過(guò)低，會(huì )造成非特性擴增。退火溫度過(guò)高，可能擴增不到目的條帶。