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Quick Cell支原體去除/預防試劑盒

訂購信息

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

支原體（Mycoplasma）是一種沒(méi)有細胞壁的原核生物，大小約0.1 - 0.6微米。目前，已發(fā)現的支原體品種有100多種。 由于支原體直徑較小，經(jīng)?？梢源┻^(guò)實(shí)驗室常規的0.20微米孔徑的除菌濾膜，高壓過(guò)濾時(shí)，甚至可以穿過(guò)0.10微米孔徑的除菌濾膜，造成細胞的支原體污染。本公司開(kāi)發(fā)的支原體清除試劑Ⅰ含有抑制支原體蛋白質(zhì)合成的藥物，而支原體清除試劑Ⅱ含有抑制支原體DNA合成的藥物。由于兩種試劑的作用機理不同，支原體清除試劑Ⅰ需要處理不少于15天，而支原體清除試劑Ⅱ只需處理7天。兩者都可以達到*殺滅和清除支原體的目的。大約5-10%的支原體會(huì )對Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ或Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ產(chǎn)生抗性，此外，也有3-5%左右的細胞會(huì )在殺滅支原體的過(guò)程中死亡，由于上述兩個(gè)原因，我們一般建議同時(shí)購買(mǎi)兩種支原體清除試劑，如果發(fā)現細胞被污染，可以將細胞分成兩份，分別用Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ和Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ同時(shí)進(jìn)行殺滅，這樣支原體對兩種藥物同時(shí)產(chǎn)生抗性和處理過(guò)程中細胞同時(shí)死亡的概率會(huì )非常低。

試劑盒組成

       Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ              1.0 mL (1000×)

       Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ              1.0 mL (1000×)

運輸和儲存

      常溫運輸，-20 ℃保存，可以保存2年。

使用方法

（一）Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ

1. 使用之前，先將Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ用PBS或者無(wú)血清培養液稀釋10倍后，放4℃冰箱保存。

2. 將50-100萬(wàn)個(gè)細胞鋪到60 mm的細胞培養皿內，加入4 mL含Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ的正常細胞培養液（使用稀釋10倍后的Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ，按1:100比例加入）。

3. 每2-3天更換細胞培養液，加入新鮮的含Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ的正常細胞培養液。期間如果細胞密度過(guò)大，請保持細胞密度適當（貼壁細胞可能需要胰酶消化），并更換新的培養皿。

4. 處理15天后，可以用支原體檢測試劑盒進(jìn)行檢測，檢測支原體是否殺滅*。如果仍有支原體殘留，可以考慮再處理6天。

5. 以后每隔1個(gè)月進(jìn)行支原體的常規檢測，以保證沒(méi)有新的支原體污染。

（二）Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ

1. 使用之前，先將Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ（注意：支原體清除試劑Ⅱ在-20 ℃保存后，解凍時(shí)可能會(huì )有細小的結晶析出）用PBS或者無(wú)血清培養液稀釋10倍后，（支原體清除試劑Ⅱ可以*溶解，放4℃冰箱保存。

2. 將50-100萬(wàn)個(gè)細胞鋪到60 mm的細胞培養皿內，加入4 mL含Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ的正常細胞培養液（使用稀釋10倍后的Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ，按1:100比例加入）。

3. 每天更換細胞培養液，加入新鮮的含Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ的正常細胞培養液。期間如果細胞密度過(guò)大，請保持細胞密度適當（貼壁細胞可能需要胰酶消化），并更換新的培養皿。

4. 處理7天后，可以用支原體檢測試劑盒進(jìn)行檢測，檢測支原體是否殺滅*。如果仍有支原體殘留，可以考慮再處理3天。

5. 以后每隔1個(gè)月進(jìn)行支原體的常規檢測，以保證沒(méi)有新的支原體污染。

注意事項

      1. 建議將細胞分成兩份，分別用Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ和Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ同時(shí)進(jìn)行殺滅，這樣支原體對兩種藥物同時(shí)產(chǎn)生抗性和處理過(guò)程中細胞同時(shí)死亡的概率會(huì )非常低。如果單獨使用一種清除試劑的話(huà)，萬(wàn)一發(fā)現細胞對其中一種清除試劑有抗性或者細胞在處理過(guò)程中死亡，又要再花7-15天的時(shí)間嘗試另外一種清除試劑的效果。

      2. 處理過(guò)程中，注意每天觀(guān)察細胞的狀況，如果發(fā)現支原體清除試劑對細胞的毒性較大，可以加大培養液中的血清濃度或者提高細胞的密度。

      3. Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ和Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ在降低濃度后（使用稀釋10倍后的Quick Cell支原體支原體清除試劑Ⅰ或者Ⅱ，按1:500比例加入）也可以加入到培養液中作為短期（1-2個(gè)月）的支原體污染預防藥物，但是不建議在細胞培養液中長(cháng)期（超過(guò)2個(gè)月）加入，因為有可能導致對該兩種藥物有抗性的支原體出現。

Quick Cell支原體清除試劑的效果圖：左側為未經(jīng)支原體清除試劑處理的人Hela細胞,經(jīng)DAPI染色后，除了細胞核為藍色外，細胞質(zhì)也有大量的絮狀核酸物質(zhì)被染成藍色，這些處于細胞質(zhì)的核酸物質(zhì)就是支原體DNA。而右側為經(jīng)過(guò)本公司的支原體清除試劑Ⅱ處理7天的Hela細胞，經(jīng)DAPI染色后，除了細胞核為藍色外，細胞質(zhì)沒(méi)有任何絮狀核酸物質(zhì)被染成藍色，說(shuō)明支原體已經(jīng)被清除。

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